配置PCR液时的注意方法

配置PCR液时的注意方法 | 时间: May-15 16:47:49 | 分类:技术栏目

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    在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定,每次配置PCR反应液很繁琐,可以将其配置类似kit的形式,按你需要的反应体系列表,然后放大100倍配置100×主反应液(100次反应),其中含buffer,Mg2+,dNTPs,但不含引物和Taq酶,然后可以10×分装或一管储存在-20度,在需要的时候拿出融开,然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数,再补加相应反应倍数的Taq和引物,混匀后分装,这样做的好处如下:

  (1)可极大的节省宝贵的时间,可早点收工,看球;
  (2)避免每次反应加样不均的可能;
  (3)大大减少PCR假阳性的产生。

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