PCR扩增产物克隆的实验要点

PCR扩增产物克隆的实验要点 | 时间: June-2 14:46:48 | 分类:技术栏目

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    引物设计主要是要注意以下几个事项:

  (1)发夹结构;
  (2)反向配对;
  (3)GC含量(40-60%);
  (4)退火温度(45-65度);
  (5)引物长度(18-27bp);
  (6)3' 端较好是C、G(提高结合度);
  (7)引物在序列中的错配位点。
  大致就这几个方面,重要性依次降低,由其是3' 端绝对不能形成发夹结构。那么你说你这段能不能设计引物呢?其实设计引物都只是好中选优的问题。

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