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Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡该怎么办

Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡该怎么办 | 时间: April-30 21:15:01 | 分类:技术栏目

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有的同学跑Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡,一时不知道什么原因,仔细分析后发现以下原因造成:

  1)首先,玻璃板一定要洗干净,用洗洁净洗,冲干净后再用双蒸水冲一,晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分,混匀的时候用手轻轻摇匀,如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。
  2)配胶时混匀要轻,尽量不产生气泡,上胶时要快,枪也不打到底。加完分离胶后用双蒸水封,待其凝固。即使在上胶时液面上有气泡,加水后也会浮上来。分离胶凝好后,倒掉里面的水,用吸水纸吸干,再加浓缩胶,迅速插梳子。
  3)倒胶的时候,用1ml的枪沿一侧缓缓加入,不要打到头,以免带入气泡!
  4)将胶在小烧杯里配好后,将电泳槽略微倾斜,将烧杯的嘴靠在玻璃边缘,直接倒进去,速度快,而且不容易产生气泡,不妨试试
  5)用双蒸水封时建议用200ul的枪加水,这样压力小,以免把胶冲起来!
  6)国产的只能是缓慢加样,别把气泡加进去。如果加进去了,小心把整个板在桌上敲敲可以让气泡浮上来。
  7)分离胶中的气泡与插梳子有关,垂直插容易产生气泡,且不容意排除。将梳子倾斜5-10度插入,即使产生气泡也可以也可以通过轻轻晃动梳子使气泡从一侧逸出。
  8)pinghw还有一个制胶起泡泡的原因,就是配胶的液体全部在四度存放,室温制胶时由于温差及凝胶聚合反应放热的关系,液体中微小的气泡在凝固的凝胶中也会放大成可见的较大的泡泡,这种情况在夏天室温较高时更容易出现。避免的方法是将制胶成分中除催化剂外的部分配置后放室温下静置一会儿,减小温差后再加入催化剂制胶。

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