western blot电泳的胶怎么放平

western blot电泳的胶怎么放平 | 时间: April-9 9:50:48 | 分类:技术栏目

近期实验室western blot电泳的胶做出来不够平整，仔细思考一下实验步骤，总结有一下几个方面原因供大家参考

1)实验用的玻璃板必须洗干净

　　2)过硫酸铵和TEMED的加量不合适，加量较多时，凝胶凝固过快也会胶不平，较多按照分子克隆加倍

　　3)加完试剂以后没有很好的摇匀，导致有些部位的聚合剂浓度过高，聚合相对较快造成胶不平；

　　4)稍微注意手法，均匀加入

　　5)灌胶后应该用水或者正丁醇压胶面或用20%的乙醇封顶(没有毒性可以除气泡，使用效果极好）。

　　6)边缘胶是不容易聚合完全的，灌完胶后要立即加无水正丁醇覆盖，浓度越低的胶越不要使用双蒸水压顶，另外还可以在压顶试剂如正丁醇中添加少许AP来增加边缘胶的凝聚强度

　　7)温度也是影响胶聚合的重要因素，有些同事为了让胶更快的凝固而把胶放到50度的温箱，由于受热不均匀，造成胶聚合不均匀。